Bitácora de práctica No. 3 , Siembra por estrias

Bitácora de Práctica No. 1. Medios de Cultivo

Práctica No. 8-9 Aglutinación en Sangre y Plasma Sanguíneo

El alumno de laboratorio clínico aprenderá a realizar una prueba de aglutinación en suero sanguíneo utilizando la sangre fresca, materiales de apoyo, centrífuga, tubo con tapón rojo y técnica de venopunción. esto de dará como resultado la elaboración de la etapa analítica en un examen de laboratorio, que en la etapa post-analítica tiene que reportar el resultado obtenido.

Materiales:

lamina de cristal para reacciones febriles

palillo de madera

centrífuga

torundas secas

jeringa desechable de 5ml

torniquete

tubo de ensaye con tapón rojo

pipeta pasteur con vulvo

reactivo febriclin

microscopio

desarrollo:

1. Técnica de Venopunción para extracción de sangre

2. Sangre fresca en volumen de 2.5 ml en tubo de ensaye con tapón rojo

3. Una vez obtenida la sangre desde el inicio de su extracción hasta el proceso de su coagulación.

4. Estando ya la sangre coagulada se le retira el tapón rojo

5. Introducimos la otra muestra en centrífuga para separar el paquete sanguíneo del plasma. (se centrifuga a 1500 revoluciones por 1 ")

6. una vez separado el plasma y el paquete sanguíneo este ultimo se trasvasa a un tubo de ensaye vacío

7. ya teniendo el liquido plasmático, con la pipeta pasteur y su vulvo realizamos punteo en la lamina de cristal ordenadamente etiquetando con los cerotipos O, H, A, B. Brucella A. y Proteus Ox19. posteriormente a este punteo agregamos una gota de reactivo febriclin y con pedazos de madera mezclamos ambos elementos (react. plasma), dejando reposar de 1-2 min para posteriormente realizar movimientos de rotación y translación para poder obtener una prueba de aglutinación la cual lograremos observar macroscópica mente en forma granular o como si hubiera arenilla existente en cada uno de los cero tipos ya marcados. si no existe lo mencionado se observará totalmente transparente con el color de reactivo homogénicamente.

para darnos una idea de esta observación macroscópica la debemos verificar al microscopio donde se observarán muchos puntos separados y agrupados indicándonos el proceso de aglutinación. esto lo observamos en objetivo 10X. todo lo contrario al proceso de aglutinación es homogéneo.

para poder reportar el resultado obtenido se requiere de la forma que el laboratorio tiene para este examen con los resultados del paciente, del laboratorio, fecha, y hora y los cerotipos grabados en el documento tífico O, o tífico H, paratífico A, paratífico B, Brucella A. y Proteus Ox19. en esta forma debemos aplicar con letras la palabra negativo o positivo dependiendo el caso.

Práctica No. 7 Observación Microscópica

La laminilla ya preparada y lista se monta en la platina del microscopio, se asegura con las pinzas de la platina y se observa a 100X donde encontraremos bacterias de forma esférica y bacterias en forma de bastó, y que ambas las podremos encontrar desde 1 a 7 piezas en separado o conjuntas en cadena, en agrupaciones de hasta tercer plano.

materiales:

• 
  
  portaobjetos teñido para observar material bacteriológico








• 
  
  aceite de inmersión








• 
  
  microscópio compuesto o fotónico








• 
  
  corriente electrica

Nota: Todo trabajo de investigación debe estar presentado en forma ordenada para su certificación en firma y subirlo a Blog.

imagen observada:

Práctica No. 6 Tinción de Gram

Se realiza el proceso de tincion de Gram en el portaobjetos anteriormente provisto con material bacteriológico ya fijado llamado Frotis.

Se utiliza la tecnica de Gram, la cual está provista con dos tinturas, un degradante y un yodo lugol. Primeramente utilizando los tiempos que marca la técnica de Gram y para ello se debe investigar esta técnica.

Al termino de esta tinción que dura de tres a cinco minutos, debemos verificar que no se queme con las tinturas, que no sea altamente degradada para que podamos observarla adecuadamente, si todo esto sucediera debe realizarse de nuevo las actividades, y a prenura del tiempo que solo nos da para dos nuevas acciones. si en la tercera oportunidad sigue el problema se realiza punto ,malo.

Si la laminilla queda debidamente teñida se l aplica una gota de aceite de inmersión para su observación.

Práctica 5. elaboración de un Frotis.

El alumno de laboratorio clínico debe realizar un trabajo de investigación muy sencillo en materia de frotis el cual después de su investigación bibliográfica debe realizar su forma practica.
Materiales

Cajas petri con medio de cultivo y microorganismos en desarrollo

Asa bacteriológica o asa de platino3

Mechero de bunsen

Vaso de precipitado (50 ml)

25 ml de agua destilada

porta objetos

Desarrollo

Con el asa bacteriológica se va a realizar un frotis en un porta objetos de cristal
Se toma el asa bacteriológica y se pone en la flama del mechero dejándola al rojo vivo para que se esterilice se retira del fuego, se toma una pequeña gota de agua destilada, con ella misma se extrae una pequeña muestra del material bacteriológico que creció en las cajas petri.
Una vez teniendo este material en el asa se deposita en el porta objetos desplazando de izquierda a derecha el material bacteriológico hasta que nos quede fino y delgado. Una vez teniéndo el frotis se fija de forma directa en sus partes laterales a lo largo para su transporte, se toma el porta objetos de forma lateral para poder pasar por encima de la flama (nunca se debe dejar en forma directa) en la flama. Una vez fijado el frotis, queda listo para el proceso de tinción.

Práctica 3. Observación microscópica de colonias bacteriológicas

El alumno debe realizar la observación microscópica en el medio de cultivo sembrado.

Materiales.

5-7cajas petri con medio de cultivo

herramienta de medición Vernier o pie de Rey

Torundas de algodón seco

Torundas de algodón alcolisadas

2 Mecheros de bunsen

Desarrollo.

Registrar la observación , medición y conteo de las colonias bacterianas. esto se debe verificar en un campo de esterilización que s e realiza con los dos mecheros bunsen, donde verificaremos el olor, color y dimensión de colonia.